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hplc技术的工作原理-凯发k8官方网站

发布时间:2021-06-03

                                   
   液相色谱 (lc) 是由俄罗斯植物学家茨维特在 1900 年代初期的工作定义的。 他的开创性研究集中在使用溶剂在填充有颗粒的色谱柱上分离从植物中提取的化合物 [叶色素]。  茨维特用颗粒填充一个开放的玻璃柱。 他发现有用的两种特定材料是粉状白垩[碳酸钙]和氧化铝。 他将样品(均质植物叶子的溶剂提取物)倒入色谱柱,然后放入颗粒床。 然后是纯溶剂。 当样品在重力作用下通过色谱柱时,您可以看到不同颜色的条带分开,因为某些成分的移动速度比其他成分快。 他将这些单独的、不同颜色的条带与样品中最初包含的不同化合物联系起来。 他根据每种化合物对颗粒的化学吸引力的不同强度,对这些化合物进行了分析和分离。 更强烈地被颗粒吸引的化合物减慢速度,而更强烈地被溶剂吸引的其他化合物移动得更快。 该过程可描述如下: 样品中所含的化合物在流动溶剂(称为流动相)和颗粒(称为固定相)之间分布或分布不同。 这会导致每种化合物以不同的速度移动,从而导致化合物分离。


什么是超高效液相色谱(uplc 技术)?
2004 年,仪器和色谱柱技术取得进一步进展,实现了液相色谱分离度、速度和灵敏度的显着提高。需要具有较小颗粒 [1.7 微米] 的色谱柱和具有专门设计用于在 15,000 psi [1,000 bar] 下提供流动相的仪器,以实现新的性能水平。必须全面创建一个新系统来执行超高效液相色谱,现在称为 uplc 技术。今天,科学家们正在使用包含更小的 1 微米直径颗粒的色谱柱和能够在 100,000 psi [6,800 bar] 下运行的仪器进行基础研究。这提供了我们对未来可能期望的一目。


hplc 是如何工作的?
在柱色谱中,溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的柱子。hplc 是一种高度改进的柱色谱法。泵在高达 400 个大气压的高压下迫使溶剂通过色谱柱。柱填充材料或吸附剂或固定相通常是由固体颗粒如二氧化硅或聚合物制成的颗粒材料。

与柱色谱相比,压力使该技术更快。这允许使用更小的颗粒作为柱填充材料。较小的颗粒具有更大的表面积,用于固定相和流过它的分子之间的相互作用。这导致混合物组分的更好分离。

加压液体通常是水、乙腈和/或甲醇等溶剂的混合物,称为流动相。

混合物的组分由于它们与吸收剂颗粒的相互作用程度不同而彼此分离。这会导致不同组分的洗脱速率不同,并导致组分在流出色谱柱时发生分离。与柱色谱相比,hplc 高度自动化且极其灵敏。







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