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液相色谱工作原理-凯发k8官方网站

发布时间:2021-06-17



     液相色谱 (lc) 是一种先进的分析技术,在生命科学和有机化学领域无处不在。它用于将混合物分成各自的化学成分,以便对这些成分进行可靠的分析。大多数化学家都会在一定程度上熟悉液相色谱仪器的使用方法,无论是常规高效液相色谱 还是更专业的快速蛋白质液相色谱。


液相色谱原理概述:

分析物:要分离和分析的化学混合物。
亲和力:分析物中化学物质与固定相之间的粘附强度,通常由吸附和溶解度决定。
流动相:分析物分散在溶剂中,然后通过液相色谱柱。
固定相:色谱柱内的静态物质,导致流动相中的组分分离。
洗脱:流动相通过固定相的过程。

      液相色谱与气相色谱的不同之处在于其液体流动相。通常,溶剂或溶剂混合物用作分析物的载体,分析物通过填充到柱中的固定介质。分析物中的各种化学物质与该固定相的亲和力不同,会与固定相发生不同的反应,从而导致不同的洗脱和保留速率(分析可以手动进行,但集成光学检测器更常用于现代应用)。这些记录分析物的成分何时从色谱柱中洗脱为一系列峰,用于生成液相色谱图。这为样品组成提供了可靠的定量和定性洞察。不同的洗脱速率是液相色谱成功的基础。这是由分子对固定相的吸附和分子在流动相中的溶解度决定的。这些特性是流动相和固定相的电化学和物理特性的函数,主要是极性和尺寸。


液相色谱系统中的组件
液相色谱有无数种类型(生物亲和、离子交换、反相、正相、尺寸排阻等),但它们中的每一种通常都基于相似的基本原理和相似的基本组件进行操作。


      最简单的仪器形式包括位于烧瓶或容器下方的液相色谱柱。选择色谱柱时要牢记的注意事项通常是几何形状(直径、长度等),而使用的固定相类型通常取决于您的液相色谱应用。例如,固体硅胶珠将分子保留在液体流动相中作为吸附的函数,而离子交换树脂则用于离子交换液相色谱。当分析物从色谱柱中流出时,它会流过检测器进行分析并记录在液相色谱数据系统中。

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