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液相色谱仪中色谱柱的安装和使用-凯发k8官方网站

发布时间:2018-09-18

       液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成,其中液相色谱柱的正确安装和使用,是液相色谱工作的关键;也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。作为液相色谱仪的销售和维护方,瑞盛科技技术人员在多年实践的基础上,为大家梳理和归纳几点液相色谱柱在安装和使用方面需要注意的事项。


       第一,液相色谱仪中,液相色谱柱的安装需要注意以下三点:


        1.拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。


        2.拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。


        3.按柱管上标示的流动相流向,将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。


       在液相色谱仪的色谱柱在使用前最好进行性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。


       1、样品的前处理,最好使用流动相溶解样品,使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质,使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。


       2、流动相的配制:液相色谱仪是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备的特点是,流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中);流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外);流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度);流动相的物化性质要与使用的检测器相适应;流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行;在流动相配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。


       3、流动相流速的选择:因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量)。


       在液相色谱仪安装液相色谱柱时,应该注意柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。


 


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